對AM菌根真菌的研究首先是從土壤的采集開始的，一般采集根際0_30<：111處的土壤、根 系混合樣品1500g左右• 土壤風千后裝入塑料袋中，標好標簽，記錄好采集地點、氣候、植 被、宿主及附近植物。對AM菌根真菌孢子的收集和分析采用濕篩傾析法：首先，將土樣混 勻，稱取l〇〇g放入容器內，用清水浸泡2〇-30min。接著，用孔徑80〇-55wm的土壤篩分層重 疊放置，小孔徑在底層并使曬面適當傾斜。用玻璃棒攪勻土壤浸泡液，將上層的浸泡液慢慢 倒入最上—層的土壤篩內，用清水沖洗各曬面的篩出物，直到沒有土壤顆粒為止。用洗瓶將 滯留的篩出物洗入干凈的培養皿內，培養皿內除了土壤顆粒和一些雜質外就是AM菌根真菌 醜子，最后在題鏡下馳子進行分離【51]。AM菌根顛孢子雛集和分馳可以采用密度 梯度法：顧名思義就是在離心管中用蔗糖和甘油等不同密度的物質組成不同的濃度梯度，使 得不同密度的AM菌根真菌的孢子分離在不同的界面上，以達到分離的目的。

觀察AM菌根真菌侵染主要通過染色法，染料通常為曲利苯藍和堿性品紅，其中曲利苯 藍染色穩定易于觀察應用比較廣泛。染色和觀察的一般步驟為：首先將宿主植物根洗凈用濾 紙吸千，均勻的把根段剪成lcm左右的根段，依宿主植物不同稱取〇.3*〇.5g (約1〇〇條根段)。 將稱好的根樣裝在特制的尼龍袋中浸泡在10%的氫氧化鈉溶液中沸水浴25_35min以對根段經 行脫色。脫色完畢后，用清水洗清將樣品浸泡在2%的鹽酸溶液中酸化。酸化后洗凈樣品，將 樣品浸泡在染色劑中（曲利苯藍或者堿性品紅）沸水浴40分鐘進行染色•染色結束后，將根 段浸泡在甘油、水、乳酸比例為1:1:1的溶液中保存和脫色，I-2天后便可觀察侵染情況。侵 染率的計算：將染色后的根段置于帶有網格（網格邊長km)的培養皿中并分散均勻，記錄交 叉點上被侵染的根段（染為藍色）占總根段的比例。侵染率（％)=被侵染的根段數Z總根段數 X100。侵染強度和叢枝豐度的計算：將染色后的根段置于培養皿中并分散，隨機選取30條 根段放置在載玻片上，每15條用一張蓋玻片滴加50%甘油覆蓋并壓片，在1〇〇倍400倍的顯 微鏡下觀察，記錄每條根段的侵染強度和叢枝豐度。侵染強度分為6個等級，根段叢枝豐度 分別4個等級[52]。

AM菌根真菌與宿主植物協同進化了數億年，已經到了不能離開宿主植物獨立生活繁殖的 地步，所以對于AM菌根真菌的擴繁都需要宿主植物的協助。目前，廣泛應用的主要有一下 主要幾種方法，單孢培養法：是把是篩法分離到的孢子經消毒后播種消毒的種子，34個月后 培養基中的孢子就從單個孢子發展出新一代的孢子，加富培養法：為了擴繁來自單孢分離培 養的純系，將河沙消毒后加入培養盆，把含有孢子、孢子果、菌絲體和被侵染根段的來自擔 孢培養的培養物混入河沙中，播種消毒后的種子。培養過程中施加Hoag丨and營養液，3個月 左右便可獲得擴繁產物。